На Международном симпозиуме в Санкт-Петербурге (1994 г) было дано

определение этого синдрома как клинического синдрома с проявлением

симптомов интоксикации при патологических состояниях неоднородных по

этиологии и обуславливающих накопление в тканях и биологических жидкостях

организма продуктов патологического обмена веществ, метаболитов,

деструкции клеточных и тканевых структур, разрушения белковых молекул

[17,18].

Шано В.П. с соавторами подчеркивает, что токсическое влияние

липополисахаридной субстанции эндотоксина проявляется комплексом нарушений,

обусловленных повреждением как циркулирующих клеток в кровотоке, так и

эндотелиоцитов, эозинофилов, нейтрофилов, макрофагов, следствием чего

является выброс в кровоток ряда биологически активных веществ – цитокинов,

интерлейкинов. Главной точкой приложения эндотоксина являются

эндотелиальные клетки, активация их приводит к высвобождению простациклина,

выделению эластазы, токсических метаболитов кислорода, факторов активации

тромбоцитов и комплемента с высвобождением терминального комплекса

комплемента, брадикинина с последующим формированием синдрома повышенной

проницаемости капилляров. Это приводит к тому, что в очаг воспаления

начинают входить компоненты крови, прежде всего фибриноген и тромбоциты.

Фибрин способствует агрегации тромбоцитов, полимеризации фибрина и –

возникновению тромбов. Следствием тромбоза являются нарушения

микроциркуляции с последующей гипоксией, что приводит к дальнейшим

повреждениям клеток в очаге воспаления. Метаболическим результатом этого

является изменение аэробного метаболизма клеток на анаэробный, повышенное

продуцирование лактата и протонов, снижение показателей рН [19].

Среди тканевых (клеточных) медиаторов воспаления важное место

занимают простагландины. Исходными продуктами для биосинтеза

простагландинов являются ненасыщенные жирные кислоты: линолевая,

арахидоновая, пентаноевая. Наибольшее значение имеет в организме

арахидоновая кислота, которая содержится в фосфолипидах клеточных мембран.

Простагландины вызывают сильное диуретическое и натрийуретическое

действие, оказывают разнообразное действие на желудочно-кишечный тракт. Они

могут стимулировать и тормозить сокращение и секреторную активность тонкой

кишки, тормозят секрецию соляной кислоты слизистой оболочки желудка.

Простагландины вызывают секрецию воды и электролитов в просвет кишки,

вызывая диарею, повышают концентрацию ц-АМФ в слизистой оболочке тонкой

кишки, влияют на прочность и упругость эритроцитарной мембраны [20, 21, 22,

49].

3. Показатели уровня эндогенной интоксикации

организма при сальмонеллезе

Анализируя данные литературы за последние десятилетия, можно сказать,

что основными показателями интоксикации при сальмонеллезе являются ПОЛ,

уровня холестерина, ЦИК, ИТ, МСМ и активность каталазы. При развитии

интоксикации на фоне сальмонеллеза происходит активный хемотаксис

нейтрофиллов в очаг воспаления, где они поглощая и переваривая чужеродный

агент, изменяют свою метаболическую активность, характеризующуюся

усилением поглощения кислорода, повышенной утилизацией глюкозы и

гиперпродукцией АФК ([pic]) [23, 24].

Перекисное окисление является универсальным механизмом взаимодействия

кислорода со многими органическими субстратами, в том числе с липидами.

Внедрение кислорода в молекулы окисленного субстрата приводит к образованию

реакционно-способных промежуточных продуктов – свободных радикалов,

гидроперекисей, которые в дальнейшем вызывают повреждение других классов

соединений – белков, нуклеиновых кислот, углеводов (рис. 1.3.1).

Метаболизм супероксидного радикала в норме

и при патологии (Владимиров Ю.Я., 1998)

Рис. 1.3.1.

Накопленные к настоящему времени данные литературы позволяют сделать

вывод о том, что свободнорадикальное окисление липидов при сальмонеллезной

инфекции играет определенную патогенетическую роль [25, 50].

Установлено, что при развитии ПОЛ в биомембранах понижается

содержание легкоокисляемых полиненасыщенных жирных кислот и изменяются

физико-химические свойства: микровязкость, текучесть, мембранный потенциал,

полярность внутренних областей мембран. Таким образом, изменяются

транспортные свойства мембраны и активность ферментов [26].

Регуляция свободнорадикального окисления обеспечивается в клетке

системой антиоксидантной защиты. Так, накапливающаяся в процессе ПОЛ

перекись водорода обезвреживается с помощью каталазы, присутствующей во

всех тканях организма. Каталаза (КФ 1.11.1.6.) представляет собой

гемсодержащий фермент с молекулярной массой около 250000 Д, локализованный

в пероксисомах клеток [27].

Митохондриальная каталаза участвует в оксидазном пути окисления,

сопровождающемся запасанием энергии в виде АТФ. Блокирование транспорта

электронов в дыхательной цепи приводит к стимуляции пероксисомального

окисления. При потологиях, связанных с нарушением энергетических процессов,

каталаза пероксисом может выходить из них и участвовать в окислении на

мембранах эндоплазматического ретикулума [28, 53].

В работе Л.Б. Оконенко с соавторами о состоянии антиоксидантной

системы судили по активности СОД, глутатионпероксидазы и каталазы, анализ

данных выявил дефицит антиоксидантов [29, 30].

При инфекционном токсикозе в мембранах эритроцитов резко снижается

содержание общих фосфолипидов, но увеличивается количество НЭЖК и

лизофосфотидилхолина, что косвенно указывает на повышение активности

фосфолилаз, которые избирательно разрушают липиды мембран. Холестерин

подвергается как активному, так и пассивному обмену в мембранах эритроцитов

[29]. Фермент лецитинхолестеролацил трансфераза превращает эфиры

холестерина в свободный холестерин и тем самым регулирует уровень

свободного холестерина в плазме, что способствует проникновению его в

мембраны. Следовательно, инактивация этого фермента в результате гипоксии

при эндотоксикозе ведет к повышению уровня эфиров холестерина в мембранах

эритроцитов [31,32].

Наряду с уровнем МДА, активности каталазы и уровня холестерина для

диагностики заболевания и его прогноза имеют значение и другие

неспецифические показатели – ЦИК, Ит, МСМ.

Синтезирующиеся при формировании иммунитета специфические антитела

обладают способностью взаимодействовать с антигенами возбудителей и тем

самым вызывать нейтрализацию патогенных микробов и их токсинов. Эта реакция

сопровождается образованием иммунных комплексов антиген – антитело [33, 34,

54, 55]. При патологических состояниях образование ИК выходит из под

контроля, в результате чего развивается та или иная болезнь ИК [рис.

1.3.2.].

Патогенетические механизмы болезней иммунных

комплексов (Сура В.В., 1987)

Рис. 1.3.2.

В результате развития эндотоксемии при сальмонеллезе организм

длительное время контактирует с избытком АГ как экзогенного (компоненты

микробных клеток), так и эндогенного (компоненты разрушенных клеток самого

организма) происхождения. Вместе с тем наблюдается угнетение системы

комплемента, ответственного за лизис микробных клеток. В этих условиях

значительного избытка АГ и недостаточности выработки АТ может привести к

образованию ИК, которые способны откладываться в определенных тканях и

вызывать острые воспалительные реакции. При значительных отложениях

наблюдаются функциональные и морфологические повреждения органов и тканей

[35].

Связываясь с клеточной мембраной ЦИК вызывают выделение в окружающую

среду протеолитических ферментов и основных пептидов. Эти вещества

повреждают протеогликановые компоненты тканей, действуют на базальную

мембрану и вызывают некроз эндотелиальных клеток [36].

ЦИК наряду с продуктами ПОЛ вызывают нарушение проницаемости мембран,

вплоть до их разрыва, что в конечном итоге может привести к гибели клетки.

В результате появляются различные вещества пентидной природы. Из них

наибольший интерес представляют молекулы средней массы.

Являясь олигопептидами с молекулярной массой 300-5000 Дальтон, они

расцениваются как универсальный критерий эндогенной интоксикации и влияют

на ее уровень и прогноз [37, 38].

МСМ образуются в организме под воздействием повреждающих эндогенных

или экзогенных факторов различного генеза, являются промежуточными

продуктами протеолиза. [39, 57].

Пристальное внимание исследователей к МСМ объясняется высокой

биологической активностью их отдельных фракций, которые ингибируют

гликолиз, глюконеогенез, пентозный цикл, синтез гемоглабина, нуклеиновых

кислот, мембранный транспорт, дагоцитов, эритропоэз, микроциркуляцию,

обладают иммунодепрессивным, цитотоксическим, нейро- и психотропным

свойствами. Сейчас, квалификационная оценка степени тяжести состояния

больных при сальмонеллезе немыслима без определения МСМ [40].

Установлено, что значительная часть циркулирующих в крови СМ не

только растворена в плазме крови, но и связана с альбумином.

Человеческий сывороточный альбулин (ЧСА) – важнейший транспортный

белок, осуществляющий перенос эндогенных метаболитов и ксенобиотиков в

плазме крови, межклеточной жидкости, в лимфе.

Универсальность транспортной функции ЧСА обеспечивается его

уникальной способностью связывать лиганды различной химической природы.

Интенсивная лигандная нагрузка молекул альбулина приводит к изменению их

структуры и связывающей способности. Такие модификационные формы ЧСА

обнаруживаются при патологии [41].

О величине токсического действия вредных веществ можно судить по ЭКА,

которая снижается после того, как токсические вещества займут центры

связывания в молекуле альбулина, что приводит к снижению детоксикационных

свойств организма. Изучение свойств альбулина является важным с точки

зрения как диагностики, так и лечения [42].

2. Материалы и методы исследований

1. Материал исследований

Уровень интоксикации оценивался по изменениям в крови больных

эффективной и общей концентраций сывороточного альбулина, малонового

диальдегида, как одного из продуктов ПОЛ, уровня холестерина, ЦИК, МСМ и

активности каталазы.

Для всех исследований бралась сыворотка крови. Исследовано 30 больных

сальмонеллезом в возрасте от 17 до 46 лет. Для контроля набиралась группа

51 человека разного пола в возрасте от 20 до 46 лет.

Кровь бралась из локтевой вены, преимущественно натощак в количестве

не менее 5 мл. Центрифугируем 1500 об/мин 10 минут. Для выполнения анализов

сыворотки необходимо использовать сразу или заморозить и хранить при t=-

20[pic]С.

2. Методы исследований

2.2.1. Определение МДА с тиобарбитуровой кислотой

(Конюхова В.С., 1989)

Об изменении интенсивности ПОЛ судим по изменению уровня вторичного

продукта ПОЛ – малонового диальдегида.

Метод основан на том, что при высокой температуре в кислой среде МДА

реагирует с 2-ТБК, образуя окрашенный розовый триметиновый комплекс с

максимумом поглощения при 535 им.

Ход работы: К 0,2 мл сыворотки крови добавить 0,2 мл дистиллированной

воды, 1 мл 0,6 % ТБК в ледяной уксусной кислоте. Кипятить 30 минут,

охладить и добавить 1 мл 5№ КОН и 2 мл изопропанола. Центрифугируют при

6000 об/мин 20 минут. Колориметрируют при 535 нм и 580 нм против контроля,

содержащего вместо плазмы воду.

Расчет: [pic] (мкМоль/л), где Е – оптическое поглащение

изопропилового экстракта; 106 – коэффициент пересчета оптической плотности.

Пример расчета: больной Максимов С., 19 лет

[pic]

концентрация МДА = [pic] (мкМоль/л).

2.2.2. Определение активности каталазы

(Королюк М.А., 1988)

Метод основан на способности перекиси водорода образовывать с солями

Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6