p align="left">Район местонахождения учебно-опытного поля характеризуется умеренно-континентальным климатом, с теплым летом, умеренно холодной зимой, устойчивым снежным покровом и хорошо выраженными переходными сезонами. Полное оттаивание почвы наблюдается 23-24 апреля. По влагообеспеченности район расположения учебно-опытного поля нужно отнести к зоне достаточного увлажнения. Две трети годового количества осадков выпадает в виде дождя, одна треть в виде снега. По природно-географическому районированию опытное поле относится к Угрино-Суходревскому району Смоленско-Московской провинции. Почвенный покров учебно-опытного поля представлен дерново-подзолистыми почвами нормального увлажнения. Почвенная разновидность- дерново-среднеподзолистые супесчаные и песчаные почвы. Для этих почв характерно хорошо развитого гумусового горизонта. Отбор проб почвы производили на дерново-подзолистых супесчаных почвах опытного поля КФ РГАУ - МСХА имени К. под посадками топинамбура. Брали пробу почвы на которую не вносились удобрения (контроль) и пробу почвы на которую вносились минеральные удобрения (NPK). Почву отбирали методом диагонали почвенным буром со стаканчиком 20 см. Объединенную пробу составляли путем смешивания точечных проб, отобранных на одной пробной площадке. В итоге проба почвы составляла 500 гр. Почву просушили и просеяли через сито диаметром 3 мм. Приготовление разведений. Образец почвы тщательно перемешали и из него отобрали навески 10 гр. Навеску поместили в стерильную колбу. Добавили 100 мл стерильной воды. Взболтали, дали 10 мин отстояться суспензии. В стерильные пробирки разлили по 9 мл стерильной воды. Стерильной пипеткой из исходной суспензии взяли 1 мл смеси и добавили в первую пробирку с водой. Это первое разведение, в нем концентрация почвы 1:10. Из первого разведения брали 1 мл раствора и добавляли его во вторую пробирку с водой. Это второе разведение с концентрацией почвы 1:100. Таким образом продолжали делать разведения до концентрации 1:100000(105). Определение общей численности почвенных микроорганизмов. Для определения общей численности почвенных микроорганизмов осуществили посев микроорганизмов на питательную среду, в качестве которой используется мясо-пептонный агар (МПА). МПА представляет собой универсальную, плотную среду, которая плавится только при температуре около 100 ?С и позволяет работать практически в любых температурных условиях. Брали 8,75 гр питательного агара в сухом виде, приготовленный промышленным способом. Добавляли его в колбу с 250 мл дистиллированной воды, полученную смесь доводили до кипения при постоянном помешивании. Кипятили до полного расплавления агара. Фильтровали среду через марлю. Затем, среду автоклавировали при давлении 1 атм в течение 20 минут. Перед розливом в чашки Петри среду охлаждали до 50? С. Поверхностный метод посева. В стерильную чашку Петри наливали агар слоем высотой 5 мм. При этом горло колбы во время разлива провели через пламя спиртовки, ватную пробку после разлива обожгли. Во время разлива пробку держали между мизинцем и безымянным пальцем правой руки. Стерильной пипеткой берем 1мл раствора из пятого разведения (105). Капали в чашку Петри с агаром и стерильным шпателем растирали по всей поверхности чашки. Глубинный метод посева. Стерильной пипеткой брали 1мл раствора из пятого разведения (105). Капали в чашку Петри и заливали агар. Чашку с агаром слегка помешали. Подсчет колоний осуществили на пятый день после посева. Затем провели морфологическое описание колоний. Морфологическое описание колоний. Колонией называют изолированное скопление клеток одного вида, выросшее в большинстве случаев из одной клетки. В зависимости от того, где развивались клетки, различают поверхностные, глубинные и донные колонии. В нашем случае образовались поверхностные колонии. Описание производили учитывая следующие признаки: форма - круглая, амебовидная, неправильная, ризоидная, круглая с фасеточным краем, круглая с валиком по краю, с ризоидным краем, нитевидная, складчатая, концентрическая, сложная. размер - измеряют диаметр колонии в миллиметрах. поверхность - гладкая, шероховатая, бороздчатая, складчатая, морщинистая, с концентрическими кругами или радиально исчерченная. профиль - выпуклый, плоский, кратерообразный, конусовидный, бугристый. блеск и прозрачность - блестящая, матовая, тусклая, мучнистая, прозрачная. цвет - бесцветная или пигментированная - белая, желтая, золотистая, оранжевая, сиреневая, красная, черная. край - ровный, волнистый, зубчатый, гладкий, лопастной, неправильный, реснитчатый. структура - однородная, мелко- или крупнозернистая, струйчатая, волокнистая. Приготовление фиксированных микропрепаратов. На обезжиренное предметное стекло наносили каплю воды бактериологической петлей, простерилизованной на пламени горелки. Вновь прогревали петлю на пламени горелки и брали пробу колонии из чашки Петри. Растирали пробу в капле воды по кругу. Мазок высушивали на воздухе, затем фиксировали. Мазок фиксировали термически, проводя стекло 2 - 3 раза через пламя горелки мазком вверх. Фиксация мазка приводит к гибели микроорганизмов, плотному прилипанию их к поверхности стекла и более легкой восприимчивости микробов к красителю. Фиксированный мазок окрашивали, заливая его поверхность раствором красителя на 2 минуты. Затем краситель с мазка смывали водой, нижнюю сторону препарата вытирали полоской фильтровальной бумаги, верхнюю осторожно обсушивали с боков, не дотрагиваясь до мазка. Препарат окончательно досушивали на воздухе. Таким образом делали препарат с каждой колонии. Готовый мазок микроскопировали. Описывали морфологию бактерий и по данным определили род бактерии. Глава 3. Результаты исследования |
Летние пробы: 105 поверхностное NPK 7 колоний Морфологическое описание колонии: Колония 1: Форма - округлая с валиком по краю Размер - 15 мм Поверхность - гладкая Профиль - плоский Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белая Край - гладкий Структура - однородная Колония 2: Форма - неправильная Размер - 7 мм Поверхность - гладкая Профиль - выпуклый Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белый Край - волнистый Структура - однородная Колония 3: Форма - округлая Размер - 5 мм Поверхность - гладкая Профиль - выпуклый Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - оранжевый Край - ровный Структура - однородная 105 поверхностное - 2 NPK 4 колонии Морфологическое описание колонии: Колония 1: Форма - складчатая Размер - 25 мм Поверхность - складчатая Профиль - зубчатый Блеск и прозрачность - матовая Цвет - грязно - белый Край - волнистый Структура - зернистая Колония 2: Форма - округлая Размер - 5 мм Поверхность - гладкая Профиль - плоский Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - оранжевая Край - ровный Структура - однородная Глубинное - 1 колония Глубинное2 - 5 колоний 105 поверхностное - лес 156 колоний Колония 1: Форма - округлая Размер - 1-2 мм Поверхность - гладкая Профиль - плоский Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белая Край - ровный Структура - однородная Колония 2: Форма - округлая с валиком по краю Размер - 13 мм Поверхность - гладкая Профиль - плоский Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белый Край - гладкий Структура - однородная 10 5 поверхностное 2 - лес 134 колонии Колония 1: Форма - округлая Размер - 1-2 мм Поверхность - гладкая Профиль - плоский Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белая Край - ровный Структура - однородная Глубинное - 5 колоний Глубинное2 - 1 колония Осенние пробы: 105 поверхностное NPK 211 колоний Морфологическое описание колонии: Колония 1: Форма - округлая Размер - 1-2 мм Поверхность - гладкая Профиль - плоский Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белая Край - ровный Структура - однородная Колония 2: Форма - округлая Размер - 9 мм Поверхность - гладкая Профиль - выпуклый Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белый Край - ровный Структура - однородная 105 поверхностное 2 NPK 195 колоний Морфологическое описание колонии: Колония 1: Форма - округлая Размер - 1-2 мм Поверхность - гладкая Профиль - плоский Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белая Край - ровный Структура - однородная Колония 2: Форма - округлая Размер - 7 мм Поверхность - гладкая Профиль - выпуклый Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белый Край - ровный Структура - однородная Глубинное - 325 колоний Глубинное2 - 311колоний 105 поверхностное - лес 2 колонии Морфологическое описание колонии: Колония 1 Форма - округлая Размер - 20 мм Поверхность - шероховатая Профиль - плоский Блеск и прозрачность - матовая Цвет - бесцветный Край - ровный Структура - зернистая Колония 2 Форма - округлая Размер - 11 мм Поверхность - гладкая Профиль - выпуклый Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белый Край - ровный Структура однородная 105 поверхностное2 - лес 3 колонии Морфологическое описание колонии: Колония 1: Форма - округлая Размер - 7 мм Поверхность - гладкая Профиль - выпуклый Блеск и прозрачность - блестящая Цвет - белый Край - ровный Структура однородная Глубинное - 1 колония Глубинное2 - 2 колонии | Палочковидные Палочковидные Скопления гексональной формы в центре кружочек Палочковидные Скопления гексональной формы в центре кружочек Кокки Палочковидные Кокки Кокки Стафилококки Кокки Стафилококки Палочковидные Стафилококки Стафилококки | | |
Сравнение числа колоний |
Лес | | Метод посева поверхностное | Время сбора почвы | | | лето | осень | | Число колоний | 290 = 145*105(КОЕ) | 5 = 2,5*105 | | Метод посева глубинный | | | | Число колоний | 6 = 3*105 | 3 = 1,5*105 | | NPK | | Метод посева поверхностное | | | | Число колоний | 11 = 5,5*105 | 306 = 203*105 | | Метод посева глубинный | | | | Число колоний | 6 = 3*105 | 636 = 318*105 | | |
*КОЕ - число колониеобразующих единиц в 1 гр почвы. Дыхание почвы X= (a-b)*k/m*t X - интенсивность дыхания а- объем щавелевой кислоты, пошедшей на титрование щелочи в колбе без почвы б - объем щавелевой кислоты, пошедшей на титрование опытных вариантов м - масса почвы т - время экспозиции к - поправка к титру к = 1 1)NPK Х = (97 мл - 73,5мл)*1/5 гр*40 мин = 0,1175 2)контроль Х = (97 мл - 80 мл)*1/5 гр*40 мин = 0,085 3)NPK Х = (88,5 мл - 112,5 мл)*1/5 гр*40 мин = -0,12 4)контроль Х = (88,5 мл - 90 мл)*1/5гр*40 мин = -0,0075 |
Название | NPK 1 | Контроль 1 | NPK 2 | Контроль 2 | | а | 97 | 97 | 88,5 | 88,5 | | б | 73,5 | 80 | 112,5 | 90 | | м | 5 | 5 | 5 | 5 | | т | 40 | 40 | 40 | 40 | | к | 1 | 1 | 1 | 1 | | Х | 0,1175 | 0,085 | -0,12 | -0,0075 | | |
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6
|