и Манчини (особенно их микроварианты) сохраняют свое значение как методы

экспресс-индикации патогенных микробов и выявления их антигенов в различных

материалах.

Перспективными являются рапид-системы для одновременной и быстрой

индикации различных видов микроорганизмов в реакциях микроагглютинации,

хотя по-прежнему не решены вопросы создания оптимальных видов и наиболее

экономичных форм таких систем. Иммунологические принципы распознавания

антигенов являются весьма тонкими, специфическими, чувствительными, с

большими индикационно-диагностическими возможностями. Комплексирование

иммунологических принципов с физическими, химическими и некоторыми другими

принципами способствовало дифференциации иммунологического направления на

ряд самостоятельных направлений, которые приводятся ниже.

3. Иммунофизическое направление, использующее различные по природе,

форме и величине виды мелкодисперсных носителей (сорбентов) антигенов и

антител, способствующих повышению чувствительности комплексных

иммунологических методов.

Реакции пассивной гемагглютинации и их модификации связаны с

использованием эритроцитарных диагностических препаратов. Эритроцитарную

диагностику с успехом применяются для ускоренного обнаружения и

идентификации как патогенных, так и условно-патогенных микроорганизмов

(например, возбудителей туляремии, бруцеллеза, сальмонеллеза и др.) в

различных патологических материалах, получаемых от больных, и в объектах

внешней среды. Реакции с эритроцитарными диагностикумами являются весьма

чувствительными, и в этом отношении часто превосходят другие серологические

реакции. Они введены в официальные инструкции по экспресс-индикации

бактериальных агентов в элементах внешней среды и в материалах, полученных

от пораженных людей и животных.

Одновременно продолжаются поиски новых носителей антигенов и антител,

которые были бы безантигенными, стабильными, не разрушающимися при

длительном хранении, а применяемые реакции — простыми по технике постановки

(например, стекольные тесты) и исследования с их помощью — экономичными.

Совершенствуются реакции с применением цветных целлюлозных частиц в

качестве носителей антигенов и антител. Положительными свойствами такого

рода препаратов являются: 1) отсутствие собственной антигенности; 2)

стабильность при длительном хранении; 3) демонстративность и простота

техники постановки реакции, обычно на предметном стекле; 4) высокая

скорость прохождения реакции; 5) экономичность.

Кроме того, полезным и оправданным считаем поиск новых носителей

антигенов и антител. В этом отношении перспективными являются ионообменные

смолы, латексы, целлюлоза и ее производные и ряд других веществ, которые

могут способствовать повышению чувствительности серологических реакций.

4. Иммунохимическое направление, связанное с использованием

разнообразных комплексных соединений специфических антител или антигенов с

химическими веществами. Присоединенные химические вещества придают им новые

феноменологические способности и свойства, тем самым, расширяя возможности

экспресс-индикации микробных агентов в частности и лабораторного анализа

вообще.

Большую популярность и практическую значимость приобрели методы

быстрого иммунофлуоресцентного анализа (прямой, непрямой,

антикомплементарный), которые ныне официально используются как методы

экспрессной индикации и быстрого определения микроорганизмов.

Дальнейшее развитие весьма перспективного иммунохимического направления

во многом зависит от химиков, которые должны разработать достаточно яркие

новые красители, вступающие в соединения со специфическими антителами и

антигенами. В результате могут быть получены препараты с новыми

феноменологическими свойствами, позволяющими проводить экспресс-индикацию

микробных культур и отдельных клеток с помощью широко распространенных

микроскопических устройств (типа МБИ различных марок).

5. Иммуноферментное направление, интенсивно развивающееся в последние

годы. Разработаны прямой, непрямой, антикомплементарный и другие методы

быстрого обнаружения микробов путем использования иммуноэнзимологического

принципа; предложены новые виды ферментов, а также разнообразные виды

хромогенных субстратов. Данное направление является весьма перспективным,

развитие его может привести в ближайшие годы к появлению новых методов

экспресс-индикации микроорганизмов.

6. Иммуноэлектрофоретическое направление успешно развивается с конца 50-

х годов. Разработаны многочисленные методы иммуноэлектрофореза. Однако для

целей экспресс-индикации микробов чаще прибегают к встречному

иммуноэлектрофорезу. Применение новых химических красителей, ферментной или

радиоактивной метки позволит резко повысить чувствительность метода

иммуноэлектропреципитации.

7. Иммунорадиологическое направление связано с использованием

разнообразных конъюгатов специфических антител или антигенов, соединенных с

радиоактивными веществами, которые придают им новые феноменологические

свойства и способности, расширяя возможности экспресс-индикационного

метода. Весьма перспективно дальнейшее развитие иммунорадиологического

направления, так как оно несомненно приведет к созданию новых, простых

методов экспресс-индикации микроорганизмов.

8. Микроцитологическое направление быстрого цитоморфо-логического

анализа связано с использованием светлопольной, фазово-контрастной или

люминесцентной микроскопии бактериологических мазковых препаратов,

обработанных и окрашенных красителями, позволяющими быстро идентифицировать

микроорганизмы по их морфологии и специфическим структурным элементам

микробной клетки. Исследованию подвергают как нативный (гной, мокрота,

моча, СМЖ, различные экссудаты и др.), так и обогащенный (например,

центрифугированием, фильтрованием и другими методами) патологический

материал.

9. Бактериологическое направление связано с ускоренным выделением и

накоплением бактериальных популяций патогенных, условно-патогенных и

санитарно-показательных микроорганизмов. Оно основано на использовании

оптимальных ростовых питательных сред, содержащих необходимые

биостимуляторы, для ускоренного получения бактериальной культуры и

частичной их идентификации по совокупности культуральных признаков.

10. Фагодиагностическое направление, которое предусматривает, с одной

стороны, идентификацию микробов с помощью специфических индикаторных

бактериофагов, а с другой,— обнаружение и индикацию специфических фагов в

патологическом и другом материалах с помощью индикаторных микробных

культур.

Ускоренная фагодиагностика в ряде случаев является необходимым и

полезным методом, позволяющим значительно сократить сроки исследований и

установить природу возбудителя даже в тех случаях, когда другими методами,

в виду его изменчивости или загрязненности материала, он остается

нераспознанным.

11. Биологическое направление, связанное с изучением токсических и

агрессивных свойств патогенных микроорганизмов. Биологические методы

осуществляются на одноклеточных организмах, на культурах клеток, куриных

эмбрионах, а также на здоровых, а еще лучше специально подготовленных

лабораторных животных. Эти методы более трудоемкие и менее точные по

сравнению с другими.

12. Физико-химическое направление. Это направление связано с

использованием сравнительно быстрых, но в то же время и достаточно сложных

по аппаратурному оформлению методов. Сюда входят методы изучения

бактериальных популяций и их экстрактов с помощью хроматографии

(газожидкостная и др.), спектроскопии (инфракрасной, ультрафиолетовой и

др.), резистографии в отношении различных антибиотических, химических и

лекарственных веществ, а также методы температурной и кислотной агрегации,

коагуляции микробных суспензий и их токсинов.

13. Рецепторное и генетическое направления быстрой индикации патогенных

и санитарно-показательных микроорганизмов. Методы, основанные на этих

принципах, только начинают развиваться. Так, с помощью целлюлозно-

глобулинового или эритроцитарно-глобулинового диагностикумов быстро

обнаруживают патогенный стафилококк, содержащий белок А, а путем гомологии

неизвестных нуклеиновых кислот с известными нуклеиновыми кислотами

устанавливают вид патогена.

14. Комплексное направление ускоренной идентификации патогенных и

санитарно-показательных микроорганизмов, использующее методы экспресс-

индикации, основанные на интеграции различных принципов, связано с

разработкой и созданием индикаторных тест-систем, позволяющих в течение

короткого срока и с минимальными затратами на анализ определить комплекс

основных признаков патогена или санитарно-показательного представителя,

достаточных для его идентификации до рода, вида и даже типа.

15. Направления, связанные с разработкой новых принципов

микробиологического анализа. Вполне вероятно, и мы вправе ожидать в

ближайшие 5—10 лет появления новых идей, подходов и принципов в

микробиологической науке и смежных с ней областях. Открытие новых видов

рецепторной, иммунологической и генетической специфичности у микробов

позволит создать новые и возможно более совершенные методы быстрой

идентификации микроорганизмов.

Основные пути развития экспресс-индикации микроорганизмов на ближайшие

годы:

1) создание и конструирование новых препаратов, способствующих

ускорению и удешевлению исследований, повышению эффективности лабораторной

диагностики инфекций и индикации патогенных и других микроорганизмов. На

этом пути предстоит сделать очень многое, поскольку общепринятые

диагностические препараты в значительной степени исчерпали свои

потенциальные возможности;

2) разработка новых более чувствительных, простых методов лабораторного

анализа.

3) разработка комплексных методов и видов исследований. Будет

продолжаться дальнейшая интеграция методов и видов исследований, имеющих

разные принципы действия, лежащие в их основе;

4) создание новых схем исследований. Поскольку лабораторная диагностика

инфекционных болезней, а также экспресс-индикация, хотя и в меньшей

степени, связаны с изучением комплекса различных свойств и особенностей

микроорганизмов с использованием обычно разнообразных методов и приемов,

основанных на различных принципах, то создание новых схем исследований с

применением новых методов является объективной реальностью и важной

задачей, вытекающей из существа самого процесса развития

микробиологического анализа;

5) разработка и создание новых методов регистрации и учета результатов

экспресс-индикационных и лабораторных исследований.

6) разработка новой микроминиатюрной лабораторной посуды, аппаратуры и

приборов для исследований;

7) автоматизация и компьютеризация исследований.

В современных условиях эти вопросы должны решаться комплексно.

Таким образом, рассмотренные основные направления и пути развития

экспресс-индикации микроорганизмов в период современного научно-

технического прогресса естественных наук безусловно получат дальнейшее

ускоренное развитие, а микробиологическая лабораторная практика обогатится

новыми быстрыми методами индикации микробов.

Экспресс-диагностика холеры

Холеру вызывают два биовара Vibrio cholerae. Один из них, выделенный

Кохом в Египте в 1883 году, назвали классическим, другой, полученный

Ф.Готшлихом на карантинной станции Эль-Тор в Северной Африке в 1906 году –

V.eltor. оба биовара неагглютинирующиеся вибрионы (НАГи), галофильные

парагемолитические вибрионы, продуцирующие гемолизин, и нехолерные вибрионы-

кислотообразователи включены в род Vibrio семейства Vibrionaceae.

Это острая кишечная инфекция, сопровождающаяся резким обезвоживанием и

обессоливанием организма. Источником инфекции является человек – больной

или носитель. Механизм передачи фекально-оральный.

Возбудители имеют соматический О- и жгутиковый Н-антигены. О-антиген

Страницы: 1, 2, 3, 4